狂犬病是狂犬病毒所致的急性傳染病,人獸共患,病毒主要通過(guò)破損的皮膚或黏膜侵入人體,人患狂犬病后的病死率接近100%。當(dāng)前對(duì)于狂犬病尚無(wú)有效治療手段,主要以注射狂犬疫苗預(yù)防為主。在狂犬疫苗制備中,細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶是一種常用的培養(yǎng)容器。
2L細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶
狂犬疫苗分為滅活疫苗、減毒活疫苗和基因疫苗,疫苗的研發(fā)是一個(gè)漫長(zhǎng)而復(fù)雜的過(guò)程,且成本較高,狂犬疫苗也經(jīng)歷了漫長(zhǎng)的發(fā)展歷程,從1882年,巴斯德將牛腦中提取的狂犬病毒株,并在兔腦內(nèi)連續(xù)傳90代,成為固定毒,到90年代,引進(jìn)Vero細(xì)胞疫苗??袢呙缫搽S著各項(xiàng)技術(shù)的提高在不斷完善,其中,利用細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶制備狂犬疫苗的操作方法如下:
1、將凍存的Vero細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇,然后使用滾瓶機(jī)進(jìn)行貼壁細(xì)胞培養(yǎng)。在37℃進(jìn)行傳代培養(yǎng),完成后收獲細(xì)胞。
細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶使用時(shí)需要借助滾瓶機(jī)一起使用,除了應(yīng)用于狂犬疫苗的制備外,還應(yīng)用于動(dòng)植物細(xì)胞、細(xì)菌、病毒等的培養(yǎng),具有操作簡(jiǎn)單、成本低,利于掌控等特點(diǎn),是大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)前的一個(gè)過(guò)度階段。