細(xì)胞培養(yǎng)在制藥工業(yè)、疫苗研制等生物制造領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用,細(xì)胞生長(zhǎng)需要培養(yǎng)基等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),而對(duì)這些營(yíng)養(yǎng)物的基本要求是無細(xì)胞毒性等影響細(xì)胞生長(zhǎng)的因素。作為培養(yǎng)基包裝的方形培養(yǎng)基瓶,怎樣檢測(cè)其細(xì)胞毒性呢?
血清培養(yǎng)基瓶
細(xì)胞毒性是化學(xué)物質(zhì)(藥物)作用于細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)和/或生理過程,如細(xì)胞膜或結(jié)構(gòu),細(xì)胞的新陳代謝過程,細(xì)胞組分或產(chǎn)物的合成、降解或釋放,離子調(diào)控及細(xì)胞分裂等過程,導(dǎo)致細(xì)胞存活、增殖和/或功能的紊亂,所引發(fā)的不良反應(yīng)。
方形培養(yǎng)基瓶細(xì)胞毒性檢測(cè)主要是根據(jù)細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變來進(jìn)行的檢測(cè),常用以下幾種方法:
1、MTT、XTT法:利用線粒體內(nèi)部酶的活性,可以將特定的四唑鹽類進(jìn)行,然后通過酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)。
2、LDH的方法:通過檢測(cè)上清中LDH的酶活性,來檢測(cè)細(xì)胞毒性。
3、其它酶方法:如檢測(cè)上清中堿性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等。
以上是細(xì)胞毒性的幾種檢測(cè)方法,除了要滿足無細(xì)胞毒性的要求外,方形培養(yǎng)基瓶還需滿足無DNA酶、無RNA酶的要求,確保細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境良好。