隨著生物制藥、疫苗、單克隆抗體等行業(yè)的快速發(fā)展，細胞工廠在大規(guī)模細胞培養(yǎng)中的重要性愈加凸顯。細胞培養(yǎng)是一項嚴謹?shù)墓ぷ鳎瑥募毎L環(huán)境、培養(yǎng)基的加入、收獲細胞等方面都有嚴格把控。
細胞工廠
在利用細胞工廠收獲細胞時要嚴格按照以下流程操作：
1、培養(yǎng)結束后將培養(yǎng)液倒出，使用無鈣無鎂磷酸鹽緩沖液（CMF-PBS）清洗（40-50 ml/層），若有需要重復清洗一次。
2、消化：消化液（10-40 ml/層）提前預熱。
3、收集：1000 rpm 離心5分鐘，去除消化液，收集細胞。
4、清洗：用CMF-PBS或培養(yǎng)基清洗消化過的培養(yǎng)器。
在收獲細胞時還要注意以下幾點：
1、確保CMF-PBS完全浸過每層培養(yǎng)面，并輕輕前后晃動細胞工廠，將殘留的培養(yǎng)液清洗干凈。
2、消化液平均分布到每層，輕輕前后左右傾斜培養(yǎng)器，確保消化液完全浸過培養(yǎng)面，輕輕拍擊培養(yǎng)器幫助細胞從表面脫離。
3、對于細胞工廠，由于不能清晰觀察中間層的細胞消化狀態(tài)，建議參照完全相同培養(yǎng)條件下的培養(yǎng)瓶或單層細胞工廠的消化狀態(tài)。亦可使用專用的多層細胞培養(yǎng)器觀察臺來觀察每層細胞的生長狀態(tài)。
細胞工廠配件
3、若清洗液或者是細胞工廠培養(yǎng)層存在大量細胞，則需要清洗多次或調(diào)整細胞消化的操作。
4、培養(yǎng)溫度的一點點偏差都可能影響到細胞的收獲率，需密切關注培養(yǎng)的溫度是所設定的溫度。
以上是細胞工廠收獲細胞的流程及注意事項，細胞對于環(huán)境非常敏感，做好細胞收獲工作是細胞培養(yǎng)成功與否的關鍵，需在各個環(huán)節(jié)都嚴格把控。
